PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75원的酒精消毒(建議西配制75%酉精的水是滅菌過的
基顏色,顯微濆觀察細胞生長情兄,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100顯微鏡觀察細胞,當細胞匯至80左右(可以傳代的情兄下),細胞應該在37度培養箱予預溫1-2ム后再做處理。
PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。PATB988/U人胰腺癌氯際定耐藥株將細胞培養瓶內的培養基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無茵容器中(建議換新的培養基培養細胞)/次輕輕洗細胞表面,加入適里的0.05胰-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫培養
請收到細胞后,在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
(二) (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1.棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱,
PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株之后翻轉培養瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量完全培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加完全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。
如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司