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伏馬毒素檢測試劑盒原理及用途

閱讀:576     發布時間:2020/2/13 16:47:22

伏馬毒素檢測試劑盒原理及用途
伏馬毒素(Fumonisins)是由串珠鐮刀菌產生的真菌毒素,目前已知有28種衍生物,研究表明伏馬毒素可引發馬的白腦軟化癥,豬的肺水腫綜合癥,此外,還可誘發人類的食道癌和肝癌、胃癌等疾病,對畜牧業和人類的健康構成危害。
伏馬毒素檢測試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的伏馬毒素和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗伏馬毒素抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含伏馬毒素含量成負相關,與標準曲線比較乘以樣本稀釋倍數即可得出樣本中伏馬毒素的殘留量。
聯免疫試驗步驟
 
    將所需試劑從4℃冷藏環境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
 
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
 
1 編    號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
 
2 加樣反應:加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應30分鐘。
 
3 洗    滌:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
 
4 顯    色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
 
5 終    止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應。
 
6 測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應在終止反應后10分鐘內完成。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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