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末端同位素標記試劑盒產品特點
閱讀:525 發布時間:2019/12/31 16:15:31
末端同位素標記試劑盒產品特點:
1. 使用本試劑盒之前,不需要對 5′末端的磷酸基團進行去磷酸化處理,因為使用的kinase 能使5′末端的磷酸與[γ-32P]ATP的γ-磷酸進行交換。
2. 合成的單鏈或雙寡核苷酸的5′末端游離的OH基團都能通過Kinase反應被標記(或者只是簡單的磷酸化)。
3. 提供的兩種反應液使交換反應和磷酸化反應都能高效進行,均能得到大于106 cpm/pmol(5′-end)的比活性。
注意事項:
1.緩沖液可在室溫融解。融解后立即置于冰中,使用前充分混勻。
2. 5×交換反應緩沖液于-20℃凍結保存時會有白色渾濁出現,但不影響反應效果。
3.酶切得到的DNA片段需經乙醇沉淀等方法純化。
4. 當用于交換反應的DNA在5 pmoles以上(約1,000bp以上)時,標記效率有時會低于106 cpm/pmol。
5. 如果交換反應所用 DNA低于500bp時,標記效率有時會有所降低。
6. 若不進行放射線標記,僅使用本試劑盒做5′末端磷酸化反應時,反應體系中的[γ-32P]ATP可用5μl的10mM ATP 代替。
7. 磷酸化反應時的[γ-32P]ATP可用[γ-35S]ATP 替代。
原創作者:上海莼試生物技術有限公司