近年來，ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應用。ELISA可用于測定抗原，也可以用于測定抗體。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可以分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等常見幾種類型。
那么，這幾種常見類型分別適用于哪些實驗？這些類型的優缺點又是什么呢？今天小編就和大家一起來了解下雙抗夾心法、間接法、競爭法。
雙抗體夾心法測抗原：雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
雙抗原夾心法測抗體：反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物，以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋，可直接用于測定，因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備，應根據抗原結構的不同，尋找合適的標記方法。
間接法：是檢測抗體zui常用的方法，本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。作為檢測抗體領域中的璀璨明珠，不僅是醫學診斷工具箱中不可或缺的一大利器，更是現代傳染病防控體系中的智慧結晶。此法巧妙地利用抗原與抗體之間猶如鎖鑰相合的特異性結合原理，構筑起一道精準識別病原體抗體的堅實屏障。在紛繁復雜的生物分子海洋中，間接法如同一位敏銳的偵探，悄無聲息地搜尋著那些潛藏在體液中的微量抗體線索，為傳染病的早期診斷與防控鋪設了堅實的基石。
具體而言，間接法通過引入一種已知且純化的病原體抗原作為“誘餌”，巧妙地設置了一場“分子級別的釣魚游戲”。當待測樣本中的抗體“魚兒”游弋至此，它們會被抗原“誘餌”緊緊吸附，形成穩定的抗原-抗體復合物。隨后，借助一系列精心設計的檢測步驟，如熒光標記、酶促反應放大信號等高科技手段，這些復合物如同夜空中最亮的星，被一一捕捉并量化分析，從而精準地揭示出樣本中抗體的存在與否及其濃度水平。
正是憑借這種高度特異性和敏感性的雙重優勢，間接法在傳染病診斷領域展現出了無與倫比的魅力與實力。無論是隱匿于血液中的病毒痕跡，還是潛伏于體液深處的細菌抗體，都難逃其法眼，使得臨床醫生能夠迅速而準確地作出診斷，為患者的及時治療與康復贏得寶貴時間。
競爭法測抗體：當抗原材料中的干擾物質不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。抗HBe的檢測一般采用此法。
競爭法測抗原：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結合。標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的酶標抗原愈少，后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
原創作者：上海莼試生物技術有限公司
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