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大量制備單克隆抗體的方法有兩類

閱讀：653     發布時間：2019/7/10 11:37:06

      經過反復克隆化獲得的抗體陽性雜交瘤細胞株應立即擴大培養（除及時凍存的細胞外）。因多次傳代易引起染色體逐漸丟失而使細胞產生抗體能力逐漸減弱甚至消失，還應盡早使用獲得的抗體陽性雜交瘤細胞株制備單克隆抗體。
大量制備單克隆抗體的方法有兩類，一類是動物體內誘生法，另一類是體外培養法
 
（一）體外培養法
將雜交瘤細胞接種到培養瓶中，在5％C02，37℃孵箱中培養數天后，收集上清液，離心去除細胞和碎片。本法所得抗體含量不高，為5—25pg／m1。但仍可滿足部分實驗的要求。另一種是雜交瘤細胞高密度培養，分兩種類型：一類是懸浮培養系統，即采用轉瓶或發酵罐式的生物反應器；另一類是細胞固定化培養系統，包括中空纖維細胞培養系統和微囊化細胞培養系統。高密度培養可使單位體積單克隆抗體含量明顯增加，產量可達lg／L。
 
（二）體內誘生法
 
接種動物常選用BALB／c小鼠或與BALB／c小鼠雜交的Fl代小鼠。接種前l周左右，于小鼠腹腔內注入降植烷或醫用液狀石蠟0．5ml。每次小鼠腹腔注射0．5X106一1X106個雜交瘤細胞。接種后7—10天，小鼠腹部逐漸長大，誘生出腹腔腫瘤并產生含單克隆抗體的腹腔積液。接種后10一14天，可分次采集腹腔積液，1只可得10～20ml（5～20mg／m1）。收集到的腹腔積液，離心去除細胞，滅活（56℃30min），再次離心，取上清液，加入0．1％疊氮鈉，分裝保存于-20℃。如凍干保存，抗體效價可保持更久。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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