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大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒使用方法

閱讀:178     發布時間:2024/4/18 11:38:38

大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒使用方法:
 
一、樣品 DNA 的制備
 
1. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
 
2. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的 DNA 釋放劑試用裝。則按下面步驟操作: 
 
3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例:在一干凈塑料
 
管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置,但最好在一周內用完,不要長期放置。一次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數量為其他數字,
配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應的調整。
 
4. 在標記好的 N+2 個離心管中,加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大小,如奶酪)或5uL 液體樣品(如牛奶)待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。
 
5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。
 
6. 95℃保溫 10 分鐘。
 
7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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