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技術服務

人鼠疫抗體（Plague-Ab）ELISA檢測試劑盒操作步驟

閱讀：355     發布時間：2023/7/13 15:39:22

人鼠疫抗體（Plague-Ab）ELISA檢測試劑盒操作步驟
 
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
 
200 IU/L
 
5號標準品
 
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 
100 IU/L
 
4號標準品
 
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
50 IU/L
 
3號標準品
 
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
25 IU/L
 
2號標準品
 
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
12.5 IU/L
 
1號標準品
 
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
 
 
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
 
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
 
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
 
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30后棄去，如此重復5次，拍干。
 
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
 
7. 溫育：操作同3。
 
8. 洗滌：操作同5。
 
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
 
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
 
11. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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