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技術服務

大鼠食管組織提取物操作流程

閱讀：480     發布時間：2022/11/24 15:55:27

大鼠食管組織提取物操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d，繪制細胞生長曲線。
雞血清白蛋白 (抗原) Albumin From Chicken Serum (≥95%, SDS... 10MG 免疫球蛋白
人纖維蛋白原 (抗原) Fibrinogen From Human Plasma (≥95%, S... 10MG 免疫球蛋白
牛IgG IgG From Bovine Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
雞IgG IgG From Chicken Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
狗IgG IgG From Dog Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
山羊IgG IgG From Goat Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
豚鼠IgG IgG From Guinea Pig Serum (≥95%, SDS-... 10MG 免疫球蛋白
馬IgG IgG From Horse Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
人IgG IgG From Human Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
小鼠IgG IgG From Mouse Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
豬IgG IgG From Porcine Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
兔IgG IgG From Rabbit Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
大鼠IgG IgG From Rat Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
人IgM (抗原) IgM From Human Serum (~90%, Liquid) 10MG 免疫球蛋白
兔抗親和素 (抗血清) Anti-Avidin antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
兔抗生物素 (抗血清) Anti-Avidin antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
羊抗牛IgG (抗血清) Anti-Bovine IgG antibody produced in g... 1ML 免疫血清
兔抗牛IgG (抗血清) Anti-Bovine IgG antibody produced in r... 1ML 免疫血清
兔抗BSA (抗血清) Anti-BSA antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
羊抗雞IgG (抗血清) Anti-Chicken IgG antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗雞IgG (抗血清) Anti-Chicken IgG antibody produced in ... 1ML 免疫血清
兔抗地高辛 (抗血清) Anti-Digoxin antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
羊抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in goat 1ML 免疫血清
兔抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in rabbit 1ML 免疫血清
 

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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