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饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒反應五要素

閱讀：449     發布時間：2021/4/13 14:55:56

饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Apple Chlorotic Leafspot Virus(ACLSV)蘋果褪綠葉斑病毒RT-PCR試劑盒
Apple Fruit Crinkle Viroid(AFCVd)蘋果皺果類病毒RT-PCR試劑盒
Apple Mosaic Virus(ApMV)蘋果花葉病毒RT-PCR試劑盒
Apple proliferation phytoplasma蘋果串生植原體PCR試劑盒
Apple Stem Grooving Virus(ASGV)蘋果莖溝病毒RT-PCR試劑盒
Apricot chlorotic leafroll phtoplasma杏褪綠卷葉植原體PCR試劑盒
Arabis Mosaic Virus(ArMV)南芥菜花葉病毒RT-PCR試劑盒
Ash yellows phytoplasma白蠟樹黃化植原體PCR試劑盒
Aster yellows phytoplasma翠菊黃化病植原體PCR試劑盒
Atropellis pinicola松生枝干潰瘍病菌PCR試劑盒
Atropellis piniphila嗜松枝干潰瘍病菌PCR試劑盒
Avocado Sunblotch Viroid(ASBVd)鱷梨日斑類病毒RT-PCR試劑盒
Banana Bract Mosaic Virus(BBrMV)香蕉苞片花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Mild Mosaic Virus(BaMMV)大麥輕度花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Stripe Mosaic Virus(BSMV)大麥條紋花葉病毒RT-PCR試劑盒
Barley Yellow Dwarf Virus(BYDV)大麥黃矮病毒RT-PCR試劑盒
Barley Yellow Mosaic Virus(BaYMV)大麥黃花葉病毒RT-PCR試劑盒
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Bean Pod Mottle Virus(BPMV)菜豆莢斑駁病毒RT-PCR試劑盒
Bean Yellow Mosaic Virus(BYMV)菜豆黃斑花葉病毒PCR試劑盒
 

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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