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ELISA試劑盒常見問題與解析

閱讀：995     發布時間：2019/1/14 13:47:00

ELISA試劑盒常見問題與解析1、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？小編自己在各大論壇看到最多的三個答案：1）48T 可做42個樣本加6個標準曲線；96T 可做90個樣本加6個標準曲線2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢測，最多還能檢測80個標本；48T的最多30個樣本。2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？96T，一般做復孔的話，做標準曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發現沒有現成的試劑盒用，現在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產的試劑盒可靠呢？如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；另外國內還是有一些資質不錯的公司，如北京達科為，上海巧伊，依科賽，深圳欣博盛等等4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。不過ELISA最好少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒最低可測濃度。5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢？提出這個問題的朋友其實該打，目前國際上各個品牌的試劑盒生廠商，都會有其偏重點，像R&D在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。Bender：粘附分子方面的試劑盒；Cayman：花生四烯酸類產品的試劑盒；Merck(Linco)：內分泌研究方面的試劑盒；

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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