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唾液乳酸桿菌PCR檢測試劑盒試劑準備步驟

閱讀:576     發布時間:2021/3/17 14:46:01

唾液乳酸桿菌PCR檢測試劑盒試劑準備步驟:
 
1. DNA模板
 
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
 
3.10×PCR Buffer
 
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
 
5.Taq酶操作步驟 
 
1.唾液乳酸桿菌PCR檢測試劑盒在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
 
      10×PCR buffer             5μl
 
      dNTP mixl                 4μl
 
       引物1(10pM)               2μl
 
       引物2(10PM)              2μl
 
       Taq酶(2U/μl)            1μl
 
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
 
      加ddH2O至               50 μl
 
    視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
 
2.唾液乳酸桿菌PCR檢測試劑盒調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
 
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
 
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Bartonella elizabethae伊麗莎白巴爾通體LAMP試劑盒
Bartonella henselae漢氏巴爾通體(漢塞巴爾通體、貓抓病、貓抓熱)LAMP試劑盒
Bartonella quintana五日熱巴爾通體LAMP試劑盒
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Bartonella vinsonii文氏巴爾通體LAMP試劑盒
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Beauveria bassiana球孢白僵菌LAMP試劑盒
Bebaru Virus(BEBV)貝巴魯病毒RT-LAMP試劑盒
Besnoitia besnoiti貝氏貝諾孢子蟲LAMP試劑盒
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Bifidobacterium longum長雙歧桿菌LAMP試劑盒
Bifidobacterium spp.雙歧桿菌屬通用LAMP試劑盒
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Bluetongue Virus(BTV)藍舌病病毒1型RT-LAMP試劑盒
Bluetongue Virus(BTV)藍舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒
 

原創作者:上海莼試生物技術有限公司

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