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ELISA試劑盒檢測過程中的常見問題以及解決方法

閱讀：1071     發布時間：2019/1/14 13:36:43

ELISA試劑盒檢測過程中的常見問題以及解決方法LISA試劑盒檢測過程中的常見問題還是很多的下面所提到的是我司在檢測過程中所遇到的一些ELISA產品會出現的問題及解決方法:　　1. 加入反應終止液后，沒有吸光值或吸光值偏低。　　a.原因：未加入酶標記物。　　解決辦法：請按照操作步驟進行。　　b.原因：試劑盒內容物未能充分回。　　解決辦法：確定試劑盒內容物回溫后再進行操作。　　c.原因：室溫太低。　　解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請于操作步驟4，適當延長溫育時間。　　d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。　　解決辦法： 請用試劑盒內所提供的清洗液清洗。　　e.原因：試劑盒已過有效期限。　　解決辦法：請更換成仍在有效期限內的試劑盒。　　2. 標準曲線線性不佳，或是平行性不好。　　a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。　　解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內)。　　b.原因：操作時間拖太久。　　解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。　　c.原因：微孔間相互污染。　　解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。　　d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。　　解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。　　e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。　　解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。　　f.原因：洗板過程發生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。　　解決辦法：請隨時監控洗板機洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。　　3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。　　a.原因：室溫太高(>25℃)。　　解決辦法： 若無法降低室內溫度，請適當縮短步驟4的溫育時間。　　b.原因：底物溶液受到污染。　　解決辦法： 若發現底物溶液已呈現淡藍色，請不要再使用。　　c.原因：反應時間超過太久。　　解決辦法：請控制反應時間。　　d.原因：酶標記物污染了盒內其它試劑。　　解決辦法：使用過的吸頭應立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)　　4. 陰性標準品的吸光值低于陽性標準品的吸光值。　　a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。　　解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。　　b.原因：洗板過程發生問題。　　解決辦法：請隨時監控洗板機洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。　　  c.原因：添加樣品或酶標記物的量不一致。　　解決辦法： 請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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