福爾馬林-氯化鋅固定液(10%)細(xì)胞具體步驟:
細(xì)胞一. 水的制備:
細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱(chēng)取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。
HCT8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株
hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
lovo/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
HCT8/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
BEL/L人肝癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
SMMC7721/L人肝癌奧沙利鉑耐藥株
A549/L人肺癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
HCT8/FU人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
ovo/FU人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
SMMC7721/FU人肝癌氟尿嘧啶耐藥株
PATU-8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株
SGC7901/FU人胃癌氟尿嘧啶耐藥株
A549/FU人肺癌氟尿嘧啶耐藥株
K562/DDP人白血病順鉑耐藥株
MCF7/DDP人乳腺癌順鉑耐藥株
HO-8910/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
COC1/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
A2780/DDP人卵巢癌順鉑耐藥株
HCT8/DDP人結(jié)腸癌順鉑耐藥株
SMMC-7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株
Huh-7/DDP人肝癌順鉑耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌順鉑耐藥株
BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司