1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀(guān)察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀(guān)察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人乳腺癌細(xì)胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞
EC109,人食管癌細(xì)胞
HGC-27人胃癌細(xì)胞
AGS人胃腺癌細(xì)胞
THP-1人單核白血病細(xì)胞
HuH-7人肝癌細(xì)胞
RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞
PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞
QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
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