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吖啶橙能透過胞膜完整的細胞，嵌入細胞核DNA，與雙鏈DNA結合后發出綠色熒光，溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細胞，嵌入核DNA，發橘紅色熒光。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察，可見四種細胞形態：活細胞(VN)，核染色質著綠色并呈正常結構；早期凋亡細胞(VA)，核染色質著綠色呈固縮狀或圓珠狀；晚期凋亡細胞(NVA)，核染色質為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀；非凋亡的死亡細胞(NVN)，核染色質著橘紅色并呈正常結構。本產品AO、EB 溶液濃度分別為100ug/ml，所含穩定劑不影響實驗效果。

使用方法：（僅供參考）

1、使用前先根據用量，將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，現用現配。

2.1、對于貼壁細胞或爬片，去掉培養基，用 PBS 洗兩遍去除殘余培養基和未貼壁細胞，加入新的 PBS；如果需要觀察全部細胞特性，保留未貼壁細胞，可以直接在培養基中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。

2.2、對于懸浮細胞，可直接加入工作液或離心收集細胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培養基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室溫放置 2-5min 后，離心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去殘余的熒光染料。加入新的 PBS 或培養基于熒光顯微鏡下觀察即可。

3、建議用藍光激發，視野下可以觀察到死細胞呈現紅色，活細胞呈現綠色。

注意事項：

1、含酚紅培養基對觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養基。

2、染色液工作濃度和染色時間可根據具體實驗情況適當調整，以期達到最佳效果。

保存：4℃避光密封保存，有效期一年。

AO-EB雙染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創作者：上海莼試生物技術有限公司

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